Piscina y sala
La sala de pruebas
Una sala tranquila y predecible da animales tranquilos e interpretables.
Los animales notan más cosas de la sala de pruebas que nosotros: el zumbido de una nevera, el olor del animal anterior, un cambio en el sitio donde se pone el experimentador. Estas preguntas tratan de la sala en sí y de las pequeñas rutinas que la mantienen igual día tras día.
Preguntas frecuentes
¿Cómo debo preparar la sala de pruebas?
Usa una sala tranquila reservada solo para las pruebas, con el laberinto en el centro y muchas claves fijas en las paredes. 1) Mantén el PC de seguimiento y al experimentador fuera de la vista del animal, tras una cortina o un biombo. 2) Mantén todo en el mismo sitio durante todo el estudio. 3) Mantén la sala a temperatura estable (normalmente 20-24 °C). Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.
Más detalle
Los animales se orientan con las claves de la sala, así que cualquier cosa que se mueva entre ensayos (personas, bolsas, carritos) puede convertirse en una clave engañosa. Oculta al experimentador con cortinas o separadores [Bromley-Brits 2011]; mantén el PC fuera de la vista de la piscina [HVS]. Las cortinas en rieles del techo permiten ocultar la sala en los ensayos con clave [Vorhees & Williams 2024]. Comprueba las vías de acceso antes de encargar una piscina grande [HVS].
Para profundizar
Morris mostró que rodear la piscina de cortinas bajaba el rendimiento al nivel del azar, lo que confirma que las claves distales de la sala impulsan el aprendizaje de lugar [Morris 1984]. Informa del montaje en el punto 9 de ARRIVE [Percie du Sert 2020].
¿Cómo preparo la sala, la piscina y la plataforma para el laberinto acuático?
Cámara sobre el centro de la piscina, piscina casi llenando la imagen, claves distales lejanas, iluminación difusa. 1) Piscina de unos 1,8-2 m de diámetro con 30 cm de pared sobre unos 30 cm de agua. 2) Plataforma justo bajo la superficie, con una superficie de 1/50 a 1/100 de la del agua. 3) Cuatro luces hacia el techo lo bastante bajas para no verse desde el agua. 4) PC de seguimiento fuera de la vista de la piscina.
Más detalle
Lo ideal es una sala cuadrada o rodeada de biombos; las salas grandes ayudan con las claves distales. Soporte de la piscina a una altura cómoda con ruedas con freno (una piscina llena puede superar 1,5 t, y el movimiento altera la calibración); piscina realmente circular con interior uniforme (negro o blanco para el contraste). Introduce a los sujetos con suavidad mirando a la pared y empieza el ensayo al entrar. HVS aconseja el agua unos 13 °C por debajo de la temperatura corporal. Los ratones suelen usar una plataforma de 10 cm en una piscina más pequeña; en una piscina grande usa una plataforma mayor (p. ej., de unos 20 cm). Las piscinas pequeñas pueden ser menos profundas. Comprueba las vías de acceso para piscinas grandes.
Para profundizar
El tamaño de piscina y plataforma y la temperatura del agua dependen de la especie y del protocolo, así que pregunta a HVS si tienes dudas. Los soportes de cámara de más de 1 m o los objetivos gran angular sirven para techos bajos.
¿A qué ruidos debo prestar atención en la sala de pruebas?
Mantén la sala en silencio y evita ruidos bruscos. Los roedores oyen ultrasonidos que nosotros no oímos, así que arregla los grifos que gotean, deja fuera los carritos que chirrían durante los ensayos y aleja los monitores del aparato. Reduce al mínimo el paso de personas. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.
Más detalle
La guía del Reino Unido cita grifos que gotean, ruedas de carritos y monitores de ordenador como fuentes de ultrasonidos (por encima de 20 kHz), y advierte contra los ruidos bruscos e irregulares [Home Office]. Un mejor control ambiental reduce la variabilidad, lo que puede reducir el número de animales necesarios [Home Office].
Para profundizar
Un detector de ultrasonidos ayuda a encontrar fuentes ocultas. Un ruido en un lado de la sala también puede servir de clave direccional, así que mantén las fuentes de sonido iguales en todos los lados de la sala y de un día a otro.
¿Cuánto tiempo deben aclimatarse los animales en la sala de pruebas antes de un ensayo?
Lleva a los animales a la sala de pruebas en sus jaulas y deja que se tranquilicen antes de empezar: al menos 30 minutos en los protocolos publicados. Tu veterinario o una persona competente fija el periodo de aclimatación tras la llegada al centro. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.
Más detalle
Los protocolos de laberinto acuático y campo abierto usan al menos 30 minutos de aclimatación a la sala [Bromley-Brits 2011; Seibenhener & Wooten 2015]. La aclimatación tras el transporte la fijan las normas nacionales o una persona competente [Home Office]. ARRIVE pide informar de la aclimatación [Percie du Sert 2020].
Para profundizar
Mantén el tiempo de aclimatación igual para cada animal y cada día, y anótalo. No encontramos ninguna fuente sobre la mejor hora del día: sé constante e infórmalo.
¿Con qué debo limpiar el laberinto o la arena entre animales?
Limpia entre animales para quitar orina, heces y rastros de olor, y deja que la superficie se seque del todo antes del siguiente animal. El etanol es habitual; algunos laboratorios usan agua hipoclorosa porque deja menos olor. Usa el mismo producto durante todo el estudio. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.
Más detalle
Los protocolos varían: etanol al 95 % para un campo abierto [Seibenhener & Wooten 2015], etanol al 10-75 % en mesas de Barnes [Gawel 2019], o agua hipoclorosa [Komada 2008]. El vapor de etanol puede afectar al comportamiento, así que ventila y deja que se evapore [Gawel 2019]. En el laberinto acuático, retira las heces y cambia el agua con regularidad [Vorhees & Williams 2024].
Para profundizar
Práctica variada: ningún producto es el mejor para todas las pruebas. Girar la mesa de Barnes además de limpiarla impide que los rastros de olor se usen como claves [Gawel 2019]. Consulta los disolventes inflamables con tu equipo de seguridad.
¿Qué condiciones del laboratorio debo anotar e informar?
Anota e informa de todas las condiciones que puedan afectar al comportamiento: temperatura de la sala y del agua, nivel de luz (lux) y tipo de fuente de luz, hora del día, quién evaluó a los animales y cualquier incidencia. Todo esto va en tus métodos. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.
Más detalle
ARRIVE 2.0 pide cuándo, dónde y con qué frecuencia se hicieron los procedimientos, aclimatación, aleatorización, ciego y criterios de punto final humanitario [Percie du Sert 2020]. Anota la temperatura del agua a diario [Vorhees & Williams 2024]. Informa del tipo de fuente de luz además de los lux, ya que el lux está ponderado para la visión humana [Peirson 2018].
Para profundizar
La aleatorización solo se informa en un 30-40 % de los artículos y el ciego en un 20 % [Percie du Sert 2020], así que informar de ellos con claridad refuerza tu trabajo.
¿Cómo puede ver el personal para trabajar sin molestar a los animales ni al seguimiento?
Usa una lámpara de escritorio con pantalla en el PC tras el biombo, orientada lejos del laberinto, y evita cambios bruscos del nivel de luz. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.
Más detalle
Usa una luz de trabajo tenue e indirecta, colocada de modo que no ilumine la piscina ni aparezca en la imagen de la cámara. La iluminación debe ser suficiente y sin deslumbramiento, evitando grandes diferencias de iluminancia [HSE HSG38; HSE lighting]. Una lámpara regulable permite fijar la luz mínima necesaria.
Para profundizar
Nuestra práctica sugerida: comprueba que la lámpara no aparece en la imagen de la cámara.
Para todo el montaje en un solo sitio, consulta el equipo para el laberinto acuático de Morris (MWM).
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