Der Testraum

Tiere bemerken mehr am Testraum als wir: das Brummen eines Kühlschranks, einen Geruch vom letzten Tier, einen anderen Standplatz der Versuchsperson. Diese Fragen behandeln den Raum selbst und die kleinen Routinen, die ihn von Tag zu Tag gleich halten.

Häufige Fragen

Wie sollte ich den Testraum einrichten?

Nutzen Sie einen ruhigen Raum nur für Tests, mit dem Labyrinth in der Mitte und vielen festen Reizen an den Wänden. 1) Tracking-PC und Versuchsperson außer Sicht des Tiers halten, hinter Vorhang oder Stellwand. 2) Alles während der ganzen Studie am selben Ort lassen. 3) Raumtemperatur stabil halten (meist 20-24 °C). Ihre örtliche Ethikkommission, Ihre Genehmigungsauflagen und Ihr Tierarzt haben immer Vorrang.

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Tiere orientieren sich an Raumreizen; alles, was sich zwischen Durchgängen bewegt (Menschen, Taschen, Wagen), kann zum irreführenden Reiz werden. Verbergen Sie die Versuchsperson hinter Vorhängen oder Trennwänden [Bromley-Brits 2011]; halten Sie den PC außer Sicht des Beckens [HVS]. Deckenvorhänge auf Schienen verbergen den Raum bei Durchgängen mit sichtbarem Hinweis [Vorhees & Williams 2024]. Prüfen Sie Zugangswege, bevor Sie ein großes Becken bestellen [HVS].

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Morris zeigte, dass ein mit Vorhängen umschlossenes Becken die Leistung auf Zufallsniveau senkte, was bestätigt, dass distale Raumreize das Ortslernen tragen [Morris 1984]. Berichten Sie den Aufbau unter ARRIVE-Punkt 9 [Percie du Sert 2020].

Quellen: Bromley-Brits et al. (2011). Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice. Journal of Visualized Experiments (53). doi:10.3791/2920; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards; Morris (1984). Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat. Journal of Neuroscience Methods 11(1):47-60. doi:10.1016/0165-0270(84)90007-4; doi:10.1371/journal.pbio.3000410

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Wie richte ich Raum, Becken und Plattform für das Wasserlabyrinth ein?

Kamera über der Beckenmitte, Becken füllt das Bild fast, distale Reize weit entfernt, diffuses Licht. 1) Becken etwa 1,8-2 m Durchmesser mit 30 cm Wand über etwa 30 cm Wasser. 2) Plattform knapp unter der Oberfläche, Oberseite 1/50 bis 1/100 der Wasserfläche. 3) Vier Deckenfluter, so niedrig, dass man sie vom Wasser aus nicht sieht. 4) Tracking-PC außer Sicht des Beckens.

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Ideal ist ein quadratischer oder mit Stellwänden umgebener Raum; größere Räume helfen bei distalen Reizen. Beckengestell in bequemer Höhe auf feststellbaren Rollen (ein volles Becken kann über 1,5 t wiegen, Bewegung ändert die Kalibrierung); Becken wirklich rund mit gleichmäßigem Inneren (schwarz oder weiß für Kontrast). Setzen Sie die Tiere sanft mit Blick zur Beckenwand ein und starten Sie den Durchgang beim Einsetzen. HVS empfiehlt Wasser etwa 13 °C unter Körpertemperatur. Mäuse nutzen oft eine 10-cm-Plattform in einem kleineren Becken; in einem großen Becken eine größere Plattform (z. B. etwa 20 cm). Kleine Becken können flacher sein. Zugangswege für große Becken prüfen.

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Becken- und Plattformgröße sowie Wassertemperatur hängen von Art und Protokoll ab; fragen Sie HVS, wenn Sie unsicher sind. Kamerahalterungen über 1 m oder Weitwinkelobjektive eignen sich für niedrige Decken.

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Auf welche Geräusche sollte ich im Testraum achten?

Halten Sie den Raum ruhig und vermeiden Sie plötzlichen Lärm. Nager hören Ultraschall, den wir nicht hören; reparieren Sie also tropfende Hähne, lassen Sie quietschende Wagen während der Durchgänge draußen und halten Sie Monitore vom Apparat fern. Personenverkehr auf ein Minimum beschränken. Ihre örtliche Ethikkommission, Ihre Genehmigungsauflagen und Ihr Tierarzt haben immer Vorrang.

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Britische Leitlinien nennen tropfende Hähne, Wagenräder und Computermonitore als Ultraschallquellen (über 20 kHz) und warnen vor plötzlichem, unregelmäßigem Lärm [Home Office]. Bessere Umgebungskontrolle verringert die Streuung und kann so die nötige Tierzahl senken [Home Office].

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Ein Ultraschalldetektor hilft, versteckte Quellen zu finden. Ein Geräusch auf einer Raumseite kann auch als Richtungsreiz wirken; halten Sie Schallquellen also auf allen Seiten und von Tag zu Tag gleich.

Quellen: gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards

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Wie lange sollten sich Tiere vor einem Durchgang im Testraum eingewöhnen?

Bringen Sie die Tiere in ihren Heimkäfigen in den Testraum und lassen Sie sie vor dem Start zur Ruhe kommen: mindestens 30 Minuten in veröffentlichten Protokollen. Die Eingewöhnungszeit nach Ankunft in der Einrichtung legt Ihr Tierarzt oder eine sachkundige Person fest. Ihre örtliche Ethikkommission, Ihre Genehmigungsauflagen und Ihr Tierarzt haben immer Vorrang.

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Wasserlabyrinth- und Open-Field-Protokolle nutzen mindestens 30 Minuten Raumgewöhnung [Bromley-Brits 2011; Seibenhener & Wooten 2015]. Die Eingewöhnung nach dem Transport regeln nationale Vorschriften oder eine sachkundige Person [Home Office]. ARRIVE verlangt, die Eingewöhnung zu berichten [Percie du Sert 2020].

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Halten Sie die Eingewöhnungszeit für jedes Tier und jeden Tag gleich und notieren Sie sie. Eine Quelle für die beste Tageszeit fanden wir nicht: bleiben Sie konsistent und berichten Sie sie.

Quellen: Bromley-Brits et al. (2011). Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice. Journal of Visualized Experiments (53). doi:10.3791/2920; Seibenhener & Wooten (2015). Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice. Journal of Visualized Experiments (96). doi:10.3791/52434; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards; doi:10.1371/journal.pbio.3000410

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Womit sollte ich Labyrinth oder Arena zwischen Tieren reinigen?

Reinigen Sie zwischen Tieren, um Urin, Kot und Duftspuren zu entfernen, und lassen Sie die Fläche vor dem nächsten Tier ganz trocknen. Ethanol ist üblich; manche Labore nutzen hypochloriges Wasser, weil es weniger riecht. Nutzen Sie während der ganzen Studie dasselbe Mittel. Ihre örtliche Ethikkommission, Ihre Genehmigungsauflagen und Ihr Tierarzt haben immer Vorrang.

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Protokolle unterscheiden sich: 95 % Ethanol für ein Open Field [Seibenhener & Wooten 2015], 10-75 % Ethanol auf Barnes-Tischen [Gawel 2019] oder hypochloriges Wasser [Komada 2008]. Ethanoldampf kann das Verhalten beeinflussen; lüften Sie also und lassen Sie es verdunsten [Gawel 2019]. Im Wasserlabyrinth Kot entfernen und das Wasser regelmäßig wechseln [Vorhees & Williams 2024].

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Uneinheitliche Praxis: Kein Mittel ist für alle Tests am besten. Den Barnes-Tisch zu drehen und zu wischen verhindert, dass Duftspuren als Reize dienen [Gawel 2019]. Klären Sie entzündliche Lösungsmittel mit Ihrem Sicherheitsteam.

Quellen: Seibenhener & Wooten (2015). Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice. Journal of Visualized Experiments (96). doi:10.3791/52434; Gawel et al. (2019). Assessment of spatial learning and memory in the Barnes maze task in rodents, methodological consideration. Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology 392(1):1-18. doi:10.1007/s00210-018-1589-y; doi:10.3791/1088; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151

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Welche Laborbedingungen sollte ich notieren und berichten?

Notieren und berichten Sie jede Bedingung, die das Verhalten beeinflussen könnte: Raum- und Wassertemperatur, Lichtstärke (Lux) und Lichtquellentyp, Tageszeit, wer die Tiere getestet hat, und ungewöhnliche Ereignisse. All das gehört in Ihre Methoden. Ihre örtliche Ethikkommission, Ihre Genehmigungsauflagen und Ihr Tierarzt haben immer Vorrang.

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ARRIVE 2.0 verlangt, wann, wo und wie oft Verfahren durchgeführt wurden, Eingewöhnung, Randomisierung, Verblindung und humane Endpunkte [Percie du Sert 2020]. Wassertemperatur täglich notieren [Vorhees & Williams 2024]. Neben Lux auch den Lichtquellentyp berichten, da Lux auf menschliches Sehen gewichtet ist [Peirson 2018].

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Randomisierung wird nur in etwa 30-40 % der Arbeiten berichtet, Verblindung in etwa 20 % [Percie du Sert 2020]; klare Angaben stärken also Ihre Arbeit.

Quellen: doi:10.1371/journal.pbio.3000410; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151; doi:10.1016/j.jneumeth.2017.04.007

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Wie kann das Personal genug sehen, ohne Tiere oder Tracking zu stören?

Nutzen Sie am abgeschirmten PC eine abgedeckte Schreibtischlampe, vom Labyrinth weg gerichtet, und vermeiden Sie plötzliche Lichtwechsel. Ihre örtliche Ethikkommission, Ihre Genehmigungsauflagen und Ihr Tierarzt haben immer Vorrang.

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Nutzen Sie gedämpftes, indirektes Arbeitslicht, so platziert, dass es weder aufs Becken scheint noch im Kamerabild erscheint. Die Beleuchtung sollte ausreichend und blendfrei sein und große Helligkeitsunterschiede vermeiden [HSE HSG38; HSE lighting]. Mit einer dimmbaren Lampe stellen Sie das nötige Minimum ein.

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Unsere empfohlene Praxis: prüfen, dass die Lampe nicht im Kamerabild erscheint.

Quellen: hse.gov.uk/pubns/books/hsg38.htm; hse.gov.uk/humanfactors/topics/lighting.htm

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Den ganzen Aufbau an einem Ort zeigt die Seite Ausrüstung für das Morris-Wasserlabyrinth (MWM).

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