Piscina y sala

Claves de la sala: dónde ponerlas y qué evitar

Tu animal está leyendo la sala. Asegúrate de que lee lo que pretendías.

Una rata en el laberinto acuático es un pequeño navegante que toma referencias de todo lo que ve. Las notas originales pedían "al menos 3 claves distintas, p. ej., 3 pósteres distintos (para que pueda 'triangular'), siempre visibles desde dentro de la piscina", colocadas bien fuera de la piscina. Esa es la parte fácil. Lo difícil son las claves que nunca quisiste dar: la cámara, una lámpara, una puerta que se abre, o tú, de pie siempre en el mismo sitio.

Si las claves están cerca del borde de la piscina, la rata podría estar asociando la clave con la plataforma en lugar de cartografiar la sala.

Preguntas frecuentes

¿Dónde debo poner las claves distales, y por qué?

Pon varias claves grandes y distintas en las paredes alrededor del laberinto, lo bastante altas para verse por encima de la pared de la piscina, y no las muevas nunca durante un estudio. Los animales las usan para deducir dónde está la plataforma o el agujero de escape. Haz el conjunto de claves asimétrico para que no haya dos direcciones iguales. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.

Más detalle

Las claves de la sala dan sobre todo dirección, mientras que el aparato da distancia [Hamilton 2007]. Usa muchas claves fijas [Vorhees & Williams 2006] bien visibles en las paredes [Vorhees & Williams 2024]. En el laberinto de Barnes, las claves se colocan a 50-200 cm y no justo encima del agujero de escape [Gawel 2019]. HVS sugiere claves a unas dos veces el diámetro de la piscina desde el centro, cada una abarcando unos 5° [HVS].

Para profundizar

La regla de 2 veces el diámetro y 5° es práctica de HVS, no un estándar probado. La asimetría es nuestra deducción a partir de la necesidad de claves distintivas.

Fuentes: doi:10.1037/0097-7403.33.2.100; Vorhees & Williams (2006). Morris water maze: procedures for assessing spatial and related forms of learning and memory. Nature Protocols 1(2):848-858. doi:10.1038/nprot.2006.116; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151; Gawel et al. (2019). Assessment of spatial learning and memory in the Barnes maze task in rodents, methodological consideration. Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology 392(1):1-18. doi:10.1007/s00210-018-1589-y; What is Morris Water Maze (MWM)?

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¿Qué tamaño y color deben tener las claves?

Usa formas grandes, llamativas y de alto contraste (el blanco y negro funciona mejor). Los roedores ven mal los detalles y no ven el rojo, así que diferencias de color que tú notas pueden no ayudarles. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.

Más detalle

La agudeza es de unos 0,5 ciclos/grado en ratones C57BL/6, de 1 en ratas pigmentadas [Prusky 2000] y de unos 0,5 en ratas albinas [Prusky 2002]. Los roedores son dicrómatas, con conos UV y de longitud de onda media y sin cono rojo [Peirson 2018; Jacobs 2001].

Para profundizar

A modo ilustrativo: a 0,5 ciclos/grado, el par de rayas más fino que se distingue abarca 2°, unos 7 cm a 2 m. Haz los elementos bastante más grandes.

Fuentes: doi:10.1016/s0042-6989(00)00081-x; doi:10.1016/s0166-4328(02)00126-2; doi:10.1016/j.jneumeth.2017.04.007; doi:10.1242/jeb.204.14.2439

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¿Qué claves no controladas podrían estar usando mis animales?

Tus animales podrían usar cualquier cosa estable que puedan ver, oír u oler, como puertas, estanterías, luces, la cámara, cortinas, radiadores, jaulas, el experimentador e incluso una rejilla de ventilación ruidosa. No pasa nada mientras no se muevan nunca. Recorre la sala a la altura de los ojos del animal y haz una lista. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.

Más detalle

Los objetos de la sala actúan como claves [Gawel 2019]; muchas claves que nunca se mueven [Vorhees & Williams 2006]. En los laberintos secos se usan claves olfativas, y no debe haber fuentes de olor (como cubos de basura) en la sala [Gawel 2019]. Las fuentes de ruido también importan [Home Office].

Para profundizar

La lista de comprobación recorriendo la sala y los puntos sobre corrientes de aire y sonido como claves son nuestra práctica sugerida, no resultados probados.

Fuentes: Gawel et al. (2019). Assessment of spatial learning and memory in the Barnes maze task in rodents, methodological consideration. Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology 392(1):1-18. doi:10.1007/s00210-018-1589-y; Vorhees & Williams (2006). Morris water maze: procedures for assessing spatial and related forms of learning and memory. Nature Protocols 1(2):848-858. doi:10.1038/nprot.2006.116; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards

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¿Cómo diseño el experimento para no crear claves accidentales?

Las claves accidentales se evitan manteniendo todo igual en cada ensayo salvo las claves previstas. 1) Usa posiciones de salida pseudoaleatorias y equilibradas. 2) Colócate en el mismo sitio en cada ensayo, oculto si es posible, con ropa neutra. 3) Mantén la sala exactamente igual cada día. 4) Usa el mismo producto de limpieza. 5) Aleatoriza y aplica el ciego cuando puedas. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.

Más detalle

Usa dos salidas cardinales y dos ordinales para que las distancias de salida a plataforma sean parecidas, con dos salidas en las que la plataforma quede a la izquierda y dos a la derecha; usa una salida no utilizada para el sondeo [Vorhees & Williams 2024]. Un experimentador visible debe llevar algo neutro [Gawel 2019]. El sexo y el olor del experimentador pueden afectar a los roedores [Sorge 2014]. Informa de la aleatorización y el ciego [Percie du Sert 2020].

Para profundizar

Revisa la plataforma: sin sombra, ondulación ni borde visible desde el punto de vista del animal (comprobación sugerida por nosotros; nuestras fuentes no tratan las sombras).

Fuentes: doi:10.1016/j.crtox.2024.100151; Gawel et al. (2019). Assessment of spatial learning and memory in the Barnes maze task in rodents, methodological consideration. Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology 392(1):1-18. doi:10.1007/s00210-018-1589-y; doi:10.1038/nmeth.2935; doi:10.1371/journal.pbio.3000410

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¿Debe haber marcas o claves dentro de la piscina?

Normalmente no. Limpia las marcas de la pared interior por encima del agua antes de cada sesión, salvo que estés evaluando deliberadamente claves proximales. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.

Más detalle

Las claves proximales cambian el tipo de memoria evaluada [HVS]. La práctica es variada: un protocolo admite claves en el interior de la piscina por encima del agua [Bromley-Brits 2011]. En el laberinto de Barnes, una pared dentro del laberinto favoreció una estrategia serial (no espacial) [Gawel 2019].

Para profundizar

Decide, mantenlo constante e infórmalo. Una junta o un arañazo pueden actuar como clave proximal: usa un interior sin juntas [Vorhees & Williams 2024].

Fuentes: What is Morris Water Maze (MWM)?; Bromley-Brits et al. (2011). Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice. Journal of Visualized Experiments (53). doi:10.3791/2920; Gawel et al. (2019). Assessment of spatial learning and memory in the Barnes maze task in rodents, methodological consideration. Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology 392(1):1-18. doi:10.1007/s00210-018-1589-y; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151

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¿Pueden la cámara de seguimiento o las luces convertirse en una clave?

Sí, si cambian. Mantén la cámara, el PC y las luces en el mismo sitio y estado en cada ensayo, y tapa cualquier LED indicador que el animal pueda ver. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.

Más detalle

Se usa infrarrojo de 940 nm porque los animales no lo ven y la cámara sí [Vorhees & Williams 2024]; mantén el PC fuera de la vista [HVS].

Para profundizar

Lo de los LED es una deducción, no un resultado publicado.

Fuentes: doi:10.1016/j.crtox.2024.100151

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¿Dónde debo colocar las claves?

Para el aprendizaje espacial, coloca claves grandes y tridimensionales lejos de la piscina, en las paredes de la sala o en estructuras fijas, visibles para los animales. 1) Evita claves en la pared de la piscina o dentro de ella. 2) Mantén la disposición constante dentro de un estudio. 3) Mover las claves no afecta al seguimiento salvo que causen reflejos.

Más detalle

Coloca claves grandes y distintas en las paredes de la sala alrededor de la piscina (claves distales), mantenlas fijas durante todo el estudio y no pongas claves en la propia piscina. Las claves distales fuera del laberinto se aproximan al infinito óptico y favorecen la navegación alocéntrica dependiente del hipocampo. Las claves en la pared de la piscina actúan como referencias locales, que pueden compensar déficits y alterar la velocidad de aprendizaje, los déficits y la comparabilidad. Quita las claves pegadas dentro de la piscina. Incluye una comparación si cambias la disposición de las claves.

Para profundizar

En RV, las claves distales pueden estar cerca de la piscina o ser grandes y lejanas; las claves proximales pueden moverse en ensayos de estrategia forzada.

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¿Qué colores ven las ratas y los ratones?

Las ratas y los ratones tienen visión de dos colores: ven el ultravioleta y el verde-azul, pero no el rojo. No tienen cono rojo, así que el rojo les parece tenue, y pueden ver un UV que nosotros no vemos. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.

Más detalle

Las ratas y los ratones son dicrómatas: tienen conos ultravioleta y de longitud de onda media (verde) pero no cono rojo, y su visión está dominada por los bastones. Bastón del ratón unos 498 nm, cono M unos 508 nm, cono UV unos 360 nm; 97 % bastones [Peirson 2018]. Las ratas tienen conos UV y M y visión de color dicromática [Jacobs 2001]. Los ratones son unas 12 veces menos sensibles que los humanos a 600 nm [Peirson 2018].

Para profundizar

El lux ignora el UV y está ponderado para humanos, así que las lámparas con emisión UV pueden parecer más brillantes a los roedores de lo que indica tu luxómetro [Peirson 2018].

Fuentes: doi:10.1016/j.jneumeth.2017.04.007; doi:10.1242/jeb.204.14.2439; doi:10.1016/j.visres.2004.01.016

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¿Debo usar claves de colores?

Usa en su lugar formas en blanco y negro o muy contrastadas. Un rojo y un verde de brillo parecido pueden parecer iguales a los roedores. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y tu veterinario siempre tienen prioridad.

Más detalle

Usa claves que se diferencien en brillo, tamaño y forma más que en color, porque los roedores ven mal el color y apenas el rojo. Los roedores carecen de cono rojo [Peirson 2018; Jacobs 2001] y tienen poca agudeza [Prusky 2000].

Para profundizar

No encontramos ninguna prueba en laberinto sobre la confusión entre claves rojas y verdes; se deduce de los datos de fotorreceptores.

Fuentes: doi:10.1016/j.jneumeth.2017.04.007; doi:10.1242/jeb.204.14.2439; doi:10.1016/s0042-6989(00)00081-x

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