Manuseio, bem-estar e estresse

O estresse faz parte do labirinto aquático: é o que faz o animal querer escapar. Em excesso, porém, o animal para de aprender ou de tentar. Um bom manuseio faz a diferença.

Perguntas frequentes

Como devo manusear e habituar os ratos?

Manuseie os ratos com delicadeza por vários dias antes do teste, para que fiquem calmos com você. Cócegas (cerca de 15 segundos por dia durante 3 dias) podem ajudá-los a relaxar com você. Pare se o rato evitar sua mão. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Mais detalhes

Cerca de 15 s por rato por dia durante 3 dias; pare se houver esquiva, postura defensiva ou vocalizações de 22 kHz [NC3Rs]. As cócegas induzem afeto positivo e reduzem o medo de humanos [Cloutier 2018].

Para se aprofundar

Acostumar os animais ao manuseio reduz o estresse [Home Office].

Fontes: nc3rs.org.uk/3rs-resources/rat-tickling; doi:10.3791/57190; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards

Relacionado: Como devo levar os animais para a sala de testes?

Como o estresse afeta os resultados do labirinto?

O estresse pode fazer os animais aprenderem pior, ficarem junto à parede ou nadarem mais devagar, o que parece problema de memória sem ser. Mantenha manuseio, temperatura, luz, ruído e horários iguais para todos os animais. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

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O treino no labirinto aquático elevou a corticosterona mais que o labirinto de Barnes, e a aprendizagem caiu conforme a corticosterona subia [Harrison 2009]. Animais estressados vão pior, então mantenha temperatura, luz e ruído constantes [Bromley-Brits 2011]. A tigmotaxia reflete ansiedade [Prut & Belzung 2003].

Para se aprofundar

Se o estresse puder diferir entre grupos (por exemplo, um fármaco que muda a ansiedade), considere também um labirinto seco [Harrison 2009; Patil 2009].

Fontes: Harrison et al. (2009). Endogenous anxiety and stress responses in water maze and Barnes maze spatial memory tasks. Behavioural Brain Research 198(1):247-251. doi:10.1016/j.bbr.2008.10.015; Bromley-Brits et al. (2011). Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice. Journal of Visualized Experiments (53). doi:10.3791/2920; Prut & Belzung (2003). The open field as a paradigm to measure the effects of drugs on anxiety-like behaviors: a review. European Journal of Pharmacology 463(1-3):3-33. doi:10.1016/s0014-2999(03)01272-x; Patil et al. (2009). Evaluation of spatial memory of C57BL/6J and CD1 mice in the Barnes maze, the Multiple T-maze and in the Morris water maze. Behavioural Brain Research 198(1):58-68. doi:10.1016/j.bbr.2008.10.029

Relacionado: Como posso reduzir o estresse dos meus animais? · Como diferenças de ansiedade e atividade entre linhagens afetam os resultados?

O experimentador pode afetar os resultados?

Sim. Quem manuseia os animais, e como, pode mudar o comportamento. Use a mesma pessoa (ou equilibre as pessoas entre os grupos), registre quem testou cada animal e mantenha-a cega ao grupo quando possível. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

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Roedores mostraram resposta de estresse a experimentadores homens e ao odor deles [Sorge 2014]. Efeitos do experimentador são um fator importante no labirinto aquático [Vorhees & Williams 2024]. O ambiente do laboratório afeta o comportamento [Chesler 2002; Crabbe 1999].

Para se aprofundar

A fuga assistida é evitada em parte porque não há dois experimentadores que guiem os animais da mesma forma [Vorhees & Williams 2024].

Fontes: doi:10.1038/nmeth.2935; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151; doi:10.1038/nn1102-1101; doi:10.1126/science.284.5420.1670

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Como posso reduzir o estresse dos meus animais?

O estresse se reduz sobretudo com manuseio delicado e uma rotina calma e invariável. Manuseie com delicadeza (túnel ou mãos em concha para camundongos; cócegas para ratos), habitue os animais, mantenha a sala calma e constante, a água na temperatura aprovada, e seque e aqueça os animais após o nado. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Mais detalhes

O estresse se reduz com manuseio delicado e não aversivo (túnel ou mãos em concha para camundongos, cócegas para ratos), habituação, condições constantes na sala e mantendo os animais aquecidos e secos após o nado. Evidências: manuseio não aversivo [Gouveia & Hurst 2017; NC3Rs]; condições constantes [Bromley-Brits 2011; Home Office]; temperatura e secagem [Iivonen 2003; Vorhees & Williams 2024].

Para se aprofundar

Refinamento e boa ciência andam juntos: menos variabilidade pode reduzir o número de animais [Home Office].

Fontes: doi:10.1038/srep44999; nc3rs.org.uk/3rs-resource-library/mouse-handling; Bromley-Brits et al. (2011). Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice. Journal of Visualized Experiments (53). doi:10.3791/2920; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards; doi:10.1016/s0166-4328(02)00369-8; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151

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