Perguntas frequentes do labirinto aquático: respostas rápidas

Estas são as respostas curtas. Clique numa pergunta para ler a resposta completa, os detalhes extras e as fontes na página onde ela está.

Piscina, plataforma e sala

Qual tamanho de plataforma, e a que profundidade abaixo da superfície?

Cerca de 10 cm de diâmetro (ou menos) e 1-1,5 cm abaixo da superfície, colocada a meio caminho entre a parede e o centro. Use uma plataforma maior se testar camundongos numa piscina para ratos. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Qual deve ser a profundidade da piscina e da água?

A água deve ser funda o bastante para o animal não tocar o fundo, com parede suficiente acima para evitar fugas. Ratos: cerca de 25-30 cm de água com cerca de 25-30 cm de parede acima. Camundongos: mais rasa, para que vejam por cima da parede as pistas da sala. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Qual cor de piscina ou corante devo usar conforme a cor da pelagem dos meus animais?

Escolha o oposto da pelagem: piscina escura (ou água escura e limpa) para animais brancos ou albinos, e água branca ou piscina branca para animais pretos ou escuros. Use bege se testar ambos. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Onde devo colocar a plataforma no labirinto aquático?

A plataforma é a pequena plataforma de fuga até a qual o animal nada no labirinto aquático; fica escondida logo abaixo da água para que o animal precise lembrar onde está. Coloque-a no meio de um quadrante, a meio caminho entre a parede e o centro da piscina, nem no centro nem encostada na parede, com o topo cerca de 1-1,5 cm abaixo da superfície. 1) Mantenha-a no mesmo lugar em todos os ensaios de aprendizagem (aquisição). 2) Retire-a para um teste de sonda. 3) Mude-a para o quadrante oposto na reversão. 4) Diga ao HVS Image onde ela está: na tela de calibração, calibre primeiro o centro da piscina (plataforma 0) e depois cada posição de plataforma (1-4, a plataforma 1 é o quadrante nordeste), ou clique em 'Suggested MWM Platform Positions' para preencher uma posição por quadrante.

Com que frequência devo trocar a água da piscina?

Retire as fezes diariamente e troque a água uma ou duas vezes por semana (mais vezes se adicionar tinta ou leite). Reabasteça no mesmo dia para que chegue à temperatura da sala durante a noite. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Como devo medir a temperatura da água?

Mexa a água e meça sempre na mesma profundidade e no mesmo lugar (por exemplo, logo abaixo da superfície perto de um ponto de partida) antes de cada sessão. Registre. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Quão iluminada deve ser a sala de testes?

Não há um único nível correto. Escolha um para o seu teste, meça com um luxímetro na altura do animal, mantenha igual todos os dias e relate. Protocolos de campo aberto costumam usar luz forte (500-1000 lux); salas de labirinto aquático costumam ser moderadas. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Como evito que reflexos e brilho na água estraguem o rastreamento?

Evitam-se reflexos iluminando a piscina de forma indireta. 1) Use luzes voltadas para o teto, ou rebata a luz no teto ou nas paredes, em vez de lâmpadas apontadas para a água. 2) Olhe a imagem da câmera: não deve haver manchas brancas na água. 3) Confira se a luz é uniforme em toda a piscina. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Cues

Onde devo colocar as pistas distais, e por quê?

Coloque várias pistas grandes e distintas nas paredes ao redor do labirinto, altas o bastante para serem vistas por cima da parede da piscina, e nunca as mova durante um estudo. Os animais as usam para deduzir onde está a plataforma ou o buraco de fuga. Faça o conjunto de pistas assimétrico para que nenhuma direção pareça igual a outra. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Que tamanho e cor as pistas devem ter?

Use formas grandes, marcantes e de alto contraste (preto e branco funciona melhor). Roedores enxergam mal os detalhes e não veem o vermelho, então diferenças de cor que você nota podem não ajudá-los. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Por que devo fazer uma tentativa sinalizada (plataforma visível)?

Um ensaio com pista verifica se cada animal enxerga e nada bem o bastante e está motivado a fugir. Se ele falhar no ensaio com pista, um resultado ruim com plataforma escondida pode não significar memória ruim. Seu comitê de ética local, as condições da licença e o veterinário sempre têm prioridade.

Que pistas não controladas meus animais podem estar usando?

Seus animais podem usar qualquer coisa estável que consigam ver, ouvir ou cheirar, como portas, prateleiras, luzes, a câmera, cortinas, aquecedores, gaiolas, o experimentador e até uma saída de ar barulhenta. Tudo bem, desde que nunca se movam. Percorra a sala na altura dos olhos do animal e faça uma lista. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

A câmera de rastreamento ou as luzes podem virar uma pista?

Sim, se mudarem. Mantenha a câmera, o PC e as luzes no mesmo lugar e estado em todos os ensaios, e cubra qualquer LED indicador que o animal possa ver. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Animais

Qual linhagem de camundongo é melhor para o labirinto aquático ou o labirinto de Barnes?

Escolha uma linhagem com visão normal e veja o que se sabe dela no seu teste. As sublinhagens C57BL/6J e 129 são comuns; evite linhagens cegas na idade adulta (por exemplo C3H/HeJ, CBA/J, FVB/NJ) em tarefas visuoespaciais. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Que linhagem de rato devo usar?

A maioria das linhagens comuns de rato aprende o labirinto aquático, então escolha uma que sirva à sua pergunta de pesquisa e mantenha a mesma. Muitas funcionam, incluindo Sprague Dawley, Long Evans, Lister, F344, Wistar e Dark Agouti. Ratos pigmentados enxergam melhor que albinos, mas os albinos ainda fazem bem o labirinto aquático. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Como devo manusear e habituar os ratos?

Manuseie os ratos com delicadeza por vários dias antes do teste, para que fiquem calmos com você. Cócegas (cerca de 15 segundos por dia durante 3 dias) podem ajudá-los a relaxar com você. Pare se o rato evitar sua mão. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Como o estresse afeta os resultados do labirinto?

O estresse pode fazer os animais aprenderem pior, ficarem junto à parede ou nadarem mais devagar, o que parece problema de memória sem ser. Mantenha manuseio, temperatura, luz, ruído e horários iguais para todos os animais. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

O experimentador pode afetar os resultados?

Sim. Quem manuseia os animais, e como, pode mudar o comportamento. Use a mesma pessoa (ou equilibre as pessoas entre os grupos), registre quem testou cada animal e mantenha-a cega ao grupo quando possível. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Quanto tempo os animais devem se acomodar na sala de testes antes de um ensaio?

Leve os animais à sala de testes nas gaiolas de origem e deixe que se acalmem antes de começar: pelo menos 30 minutos nos protocolos publicados. O veterinário ou uma pessoa competente define o período de aclimatação após a chegada ao biotério. O comitê de ética local, as condições da sua licença e o veterinário sempre têm precedência.

Medidas

Quais são as limitações da latência de fuga?

A latência de fuga é o tempo que o sujeito leva para chegar à plataforma. A latência não mostra a estratégia e é afetada pela velocidade, pela distância de largada e por efeitos de piso ou teto, então leia-a com a razão de trajetória, a direção, as medidas de Gallagher e a identificação de comportamentos. A HVS começa a cronometrar quando você clica ao entrar o sujeito e termina por detecção da plataforma, após um tempo de permanência ou manualmente.

Quando a porcentagem de tempo no quadrante-alvo é uma boa medida?

Nos testes de sonda, uma preferência pelo quadrante-alvo independentemente do ponto de largada indica memória espacial, mas só quando as plataformas ficam no centro dos quadrantes. Caso contrário, use passagens próximas e medidas de Gallagher. As fatias de tempo revelam a preferência inicial.

Por que os cruzamentos da plataforma podem enganar nos testes de sonda?

Cruzamentos do ensaio inteiro favorecem sujeitos que continuam voltando (perseveram) em relação aos flexíveis que verificam e seguem em frente. Use também a direção, o primeiro encontro próximo, as fatias de tempo e a identificação de comportamentos.

Como interpreto a tigmotaxia, e como comparo de forma justa os sujeitos tigmotáticos?

A tigmotaxia é a tendência de um animal a ficar perto das paredes de uma arena, muitas vezes chamada de “abraçar a parede”; no labirinto aquático significa nadar no anel externo junto à parede da piscina em vez de procurar na água aberta. Ficar um pouco junto à parede nos primeiros ensaios é normal enquanto os animais se adaptam; se continuar, pode refletir estresse ou ansiedade, não entender a tarefa, um problema sensorial ou motor, ou pouca motivação. O HVS Image informa a porcentagem do tempo e da trajetória numa faixa junto à parede. Para comparar de forma justa animais que ficam junto à parede, use o ângulo de direção, as fatias de tempo e Gallagher por segmento, e não Gallagher do ensaio inteiro ou medidas de área próxima.

Como devo interpretar uma inatividade alta?

Inatividade alta significa que o sujeito passou boa parte do ensaio flutuando ou se movendo muito devagar. Pode vir de cansaço, estresse, pouca motivação, efeito de fármaco, problema de movimento ou memória ruim, então não é por si só uma pontuação de aprendizagem. 1) Compare-a com a latência e o comprimento da trajetória. 2) Verifique cruzamentos, encontros próximos e proximidade de Gallagher. 3) Boa proximidade com inatividade alta sugere que o sujeito ainda sabe onde está o alvo.

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Para uma única página sobre todas as medidas comuns, veja o guia da HVS Image para a análise do labirinto aquático de Morris.