Dicas de rastreamento HVS
Por que cada passo importa no HVS Image
Entenda o porquê e o como fica mais fácil.
Calibração
A calibração informa ao HVS Image o tamanho real da sua piscina ou arena e onde fica cada alvo, para que todas as medidas de distância, velocidade e alvo fiquem corretas.
Mais detalhes
Todas as distâncias são calculadas a partir do diâmetro da piscina que você digita na calibração, então um diâmetro maior que a superfície real da água infla o comprimento da trajetória e a velocidade. As posições calibradas são guardadas por número, e o ‘Platform Number’ de cada ensaio se refere a elas; medidas por quadrante só fazem sentido quando as plataformas ficam no centro dos quadrantes.
Na implementação do Direct Path, as distâncias são calculadas em pixels e convertidas com o valor calibrado de pixels por centímetro, e as zonas de alvo e de encontro próximo ficam centradas na posição calibrada do alvo. Clicar nas bordas da piscina na ordem errada espelha o gráfico, então conferir um ensaio plotado com a posição real da plataforma protege todo o conjunto de dados.
Guardar os arquivos de dados brutos
Seus arquivos .hvs são o registro bruto de cada ensaio, então guardá-los permite reanalisar sempre.
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Guarde todos os arquivos .hvs: os arquivos SUM e CST podem ser recriados a partir deles. Faça backup com frequência e mova os arquivos concluídos para outro lugar em vez de apagá-los (arquivos movidos não aparecem mais na lista).
Reanalisar importa cientificamente: novas medidas e definições corrigidas (por exemplo, as classificações Direct Path) podem ser aplicadas a estudos concluídos, e a nota técnica do Direct Path lista a análise retrospectiva de estudos concluídos como aplicação. Em RV, guarde os arquivos .BOND além de .hvs e .sum.
Arquivos Master Experiment
Um arquivo TXP lista com antecedência o ponto de largada, o alvo, o sujeito e o grupo de cada ensaio, para as séries rodarem na ordem certa com menos erros de digitação.
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Cada linha TXP traz ponto de largada, plataforma, sujeito e descritor (por exemplo N,2,Subject1,GroupA), então os dados do ensaio são digitados uma vez, com antecedência, e não durante o teste.
A latência depende do ponto de largada e da distância entre largada e alvo, então um arquivo TXP que define a sequência planejada de largadas torna essa sequência fácil de seguir, conferir e relatar.
Computador dedicado ao rastreamento
Um computador de rastreamento sem nada mais rodando mantém a temporização precisa, para trajetórias e tempos serem registrados sem falhas.
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Outro software pode tirar uma fração de segundo ou mais da aquisição de dados em tempo real, então o computador de rastreamento (ou de RV) deve ser dedicado ao HVS Image, com varreduras e atualizações feitas manualmente fora dos horários de rastreamento.
Sintomas de interferência em segundo plano incluem relógio do ensaio travado, quadros perdidos, perda breve do rastreamento e linhas retas nos gráficos de trajetória; cada um distorce latência, comprimento da trajetória e velocidade, então uma aquisição confiável é pré-requisito para medidas válidas.
Calibrate
Esta tela define a escala e as posições de alvo de que dependem todas as medidas posteriores.
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As bordas são clicadas na ordem N, S, O, L; depois os alvos, o centro primeiro para virar a posição 0. ‘Check Lighting’ e o limiar também são ajustados aqui, então esta tela controla tanto a escala quanto a qualidade do rastreamento.
Como as medidas baseadas no alvo (cruzamentos, encontros próximos, proximidade de Gallagher, Direct Path) são calculadas em relação às posições calibradas, calibrar todas as posições que possa usar, incluindo antigos alvos para a reversão, permite analisá-las depois.
Run
Esta tela registra cada ensaio, e iniciá-lo no momento de soltar o animal mantém os tempos justos.
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Clique em ‘RUN’ ao soltar o animal: ligar o início à soltura e detectar a chegada de forma objetiva evita inícios prematuros e tempos de chegada subjetivos. ‘Auto-end on platform’, com atraso opcional, dá um ponto final objetivo.
A escolha do ponto final importa: a parada automática ao detectar a plataforma conta subidas breves ou parciais, um atraso de permanência exclui contatos breves e a parada manual permite tempo definido pelo experimentador. Use a mesma opção em todos os grupos e relate-a.
Analyse
Esta tela transforma trajetórias em medidas, e você pode reanalisar quando quiser sem repetir os animais.
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Analise um ensaio com ‘Full Analysis’ ou vários com ‘Analyze Batch or Series’ num arquivo .sum. As configurações ‘Advanced’ (tamanho do contador, faixa de tigmotaxia, distância de orientação, fatias de tempo) mudam os resultados, então anote os valores usados.
Configurações como Counter diam x e Heading distance mudam os resultados do Direct Path; informe a versão e essas configurações junto com os dados reanalisados. O Heading range é exportado para o valor em uso ficar registrado.
Setup Custom
Esta tela cria um arquivo de planilha organizado só com as medidas que você escolheu, pronto para a estatística.
Mais detalhes
Arquivos CST são arquivos separados por vírgula para Excel e pacotes estatísticos, com uma linha por ensaio. Escolher as medidas com antecedência mantém as exportações consistentes entre coortes.
Decidir as medidas principais antes de exportar, e manter a mesma definição CST entre coortes, favorece um relato transparente; arquivos CST adicionais para medidas exploratórias podem ser criados depois a partir do mesmo .sum.
Telas de campo aberto e NOR
As telas de campo aberto medem onde e quanto o animal se move, o que reflete atividade e comportamento do tipo ansioso.
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Os resultados incluem trajetória total, velocidade média, uso de zonas ou células, entradas e latências (−1 significa não visitada), e congelamento ou inatividade definidos pela sua própria janela de tempo e critérios de movimento.
O campo aberto é muito usado para avaliar efeitos de drogas sobre a ansiedade: Prut e Belzung (2003) viram que benzodiazepínicos e agonistas 5-HT1A mostraram efeitos ansiolíticos na maioria dos casos, enquanto os ISRS foram pouco eficazes como ansiolíticos no teste. Seibenhener e Wooten (2015) descrevem seu uso para comportamento locomotor e do tipo ansioso.
Telas de labirintos de braços
As entradas nos braços mostram escolhas, que é como os labirintos em T, em Y, em cruz e radiais testam memória e comportamento do tipo ansioso.
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O Detection Area define até onde dentro de um braço conta como entrada: 100% conta qualquer entrada, 25% só entradas no quarto mais distante. Os dados por braço vão do braço mais à esquerda no sentido horário.
Usos clássicos incluem a alternância espontânea no labirinto em T, sensível à disfunção do hipocampo (Deacon e Rawlins, 2006), a memória espacial em braços radiais (Olton e Samuelson, 1976) e as entradas em braços abertos versus fechados no labirinto em cruz elevado como medida de ansiedade (Pellow et al., 1985).
Telas de nado forçado
As telas de nado forçado dividem o tempo em escalar, nadar ou flutuar e mergulhar, conforme onde está o ponto mais alto do animal.
Mais detalhes
A área de rastreamento é uma faixa em volta da linha d'água dividida em terços: ponto mais alto no terço superior conta como escalar, no terço do meio como nadar ou flutuar, no terço inferior como mergulhar.
O teste de nado forçado foi apresentado como modelo animal sensível a tratamentos antidepressivos (Porsolt et al., 1977; referência proposta aguardando aprovação). A interpretação de cada porcentagem depende do seu protocolo; ainda não há artigo de interpretação do nado forçado na base de publicações verificadas.
HVS 6D VR (vrScript e botões de início)
A RV permite fazer o labirinto aquático com pessoas, usando a mesma análise dos animais.
Mais detalhes
Os arquivos vrScript definem a cena, o alvo, os pontos de largada e os tipos de ensaio; os ensaios de RV são analisados na janela Analyse do labirinto aquático, então valem as mesmas medidas.
A tarefa aquática de Morris virtual revelou prejuízo grave após ressecção do hipocampo (Astur et al., 2002) e diferenças entre sexos (Astur et al., 1998). Thornberry et al. (2021) apontam montagens inconsistentes em mais de 200 artigos de RV e pedem padronização; por isso relatar suas configurações de vrScript importa.
Labirinto de Barnes (Barnes marcado)
Com ‘Barnes’ marcado, as mesmas telas testam a memória espacial num labirinto seco, sem nado.
Mais detalhes
O Barnes usa ‘Hole Number’ e ‘Auto-end on escape hole’ no lugar dos rótulos da plataforma; o controle deslizante do tamanho do sujeito serve para ignorar fezes.
Barnes (1979) usou a plataforma circular para mostrar pior memória espacial em ratos senescentes. É considerado menos estressante que o labirinto aquático (Rosenfeld e Ferguson, 2014), e o treino no labirinto aquático elevou a corticosterona mais que o treino no Barnes (Harrison et al., 2009). Camundongos podem resolvê-lo com estratégias espaciais, de pista ou seriais (Harrison et al., 2006), então a análise de estratégias é valiosa.
Para saber por que o rastreamento supera o cronômetro nestes passos, veja por que fazer videorrastreamento no labirinto aquático de Morris.
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