Variantes
El laberinto de Barnes
Memoria espacial, sin nadar.
Carol Barnes presentó el laberinto de plataforma circular en 1979, en un estudio sobre la memoria en ratas envejecidas. El animal aprende cuál de los agujeros del borde de una mesa circular conduce a una caja de escape, usando claves del entorno de la sala. No hay agua, así que el animal nunca tiene que nadar.
El laberinto de Barnes en ocho pasos
Abre el laberinto de Barnes, calibra la mesa y los agujeros, ajusta el umbral y el tamaño del sujeto, ejecuta y luego analiza con las opciones de Barnes.
- Limpia el laberinto para que no queden heces, ilumínalo de forma uniforme para que se vea casi blanco en pantalla y conecta primero la cámara.
- Haz clic en ‘Barnes Maze’; su casilla ‘Barnes’ se marca automáticamente.
- Haz clic en ‘CALIBRATE’, introduce el ‘Pool or Arena Diameter (cm)’, haz clic en los extremos superior, inferior, izquierdo y derecho de la superficie del laberinto, luego calibra los agujeros (o usa ‘Suggested Hole Positions’) y haz clic en ‘Save and Return’.
- Haz clic en ‘CHECK LIGHTING’ y elimina los puntos de sombra y de reflejo.
- Empieza con el umbral en 100 y mueve el control ‘Subject size’ a la derecha hasta que la retícula encierre un área mayor que cualquier excremento pero algo menor que el animal.
- Introduce ‘Max Seconds’, elige una opción de ‘Auto-end on escape hole’ y el ‘Hole Number’, luego haz clic en ‘PREPARE’ y alinea el agujero objetivo con el círculo de la pantalla.
- Haz clic en ‘RUN’ al soltar al animal. Salvo que ‘Auto-end on escape hole’ esté activado, haz clic en ‘END’ cuando entre por completo en el agujero objetivo.
- Haz clic en ‘ANALYZE’ y luego en ‘Advanced’: ajusta la franja de tigmotaxis para que los agujeros queden dentro (p. ej. 0,65) y el tamaño de los contadores (p. ej. 2,0), y luego crea tus archivos SUM y CST.
Más detalle
Trabaja desde el lado sur (la parte inferior de la pantalla); un vaso de precipitados pequeño como recipiente de salida y un guante y una manga blancos ayudan a evitar sombras. El día de la prueba de sondeo, introduce el agujero objetivo aprendido, marca ‘Probe’ y pon ‘Auto-end on escape hole’ en ‘No’.
HVS Image cuenta automáticamente las aproximaciones a los agujeros, registra las exploraciones (errores) por agujero y da la latencia y la trayectoria hasta el agujero objetivo y la longitud de la trayectoria primaria. Los resultados de Barnes usan la terminología de Barnes (agujeros, no plataformas).
Errores en Barnes, visitas a agujeros y trayectoria primaria
Los resultados de Barnes indican cuántos agujeros incorrectos investigó el sujeto (errores), qué agujeros visitó y con qué rapidez y precisión llegó al agujero de escape.
Más detalle
Las medidas incluyen aproximaciones a agujeros contadas automáticamente, exploraciones (errores) por agujero, latencia y trayectoria hasta el agujero objetivo y longitud de la trayectoria primaria (el recorrido desde la salida hasta la primera aproximación al agujero de escape). Ajusta la franja de tigmotaxis para que los agujeros queden dentro (p. ej. 0,65) y el tamaño de los contadores para la investigación de agujeros (p. ej. 2,0).
Para un día de prueba de sondeo, marca ‘Probe’ en Monitor en la pantalla Run del laberinto de Barnes. Los errores primarios son los agujeros incorrectos investigados antes de la primera aproximación al agujero de escape.
Leer los resultados del laberinto de Barnes
Mira los errores (asomadas) por agujero, la latencia y la trayectoria hasta el agujero objetivo y la longitud de la trayectoria primaria, y comprueba que las trayectorias se ven limpias antes de interpretarlas.
- Patrón típico de los controles
- Aún no se ha confirmado un patrón publicado para esta prueba, así que compara con tu propio grupo control. HVS Image informa de las aproximaciones a agujeros contadas automáticamente, las asomadas (errores) por agujero, la latencia y la trayectoria hasta el agujero objetivo y la longitud de la trayectoria primaria (el recorrido desde la salida hasta la primera aproximación al agujero de escape).
- Signos de déficit
- En el estudio original de la plataforma, las ratas seniles mostraron peor memoria del lugar recompensado (Barnes, 1979).
- Signos de memoria sólida
- Aún no se ha confirmado un patrón publicado para esta prueba, así que compara con tu propio grupo control.
Problemas de montaje que parecen resultados
- La trayectoria salta al principio: una sombra pasajera (tu mano o el recipiente de salida) atrae al sistema de seguimiento; usa un vaso de precipitados de vidrio pequeño, guante y manga blancos, y trabaja desde el extremo sur.
- Líneas rectas (breves pérdidas de seguimiento): haz la iluminación uniforme y difusa, elimina los puntos negros (sombras) en la comprobación de iluminación, evita los puntos rojos (reflejos) y cierra otros programas.
- El ensayo no termina en el agujero de escape: solo termina solo si ‘Auto-end on escape hole’ está activado; si no, haz clic en ‘END’ cuando el animal entre del todo en el agujero.
Más detalle
Las trayectorias no se suavizan artificialmente, así que las trayectorias irregulares reflejan movimientos bruscos. Un animal puede investigar un agujero sin entrar, por eso muchos usuarios dejan ‘Auto-end on escape hole’ en ‘No’ y terminan el ensayo ellos mismos. Ajusta la banda de tigmotaxis para que los agujeros queden dentro antes de leer aproximaciones y errores.
Barnes (1979) evaluó ratas en una plataforma circular que favorecía el uso de claves espaciales para resolverla, y vio que la magnitud del refuerzo sináptico se correlacionaba estadísticamente con la capacidad de realizar la tarea de la plataforma circular.
Preguntas frecuentes
¿Cómo calibro el laberinto de Barnes y por qué aparece una mancha blanca o los agujeros no quedan enmascarados?
Abre el laberinto de Barnes, haz clic en Calibrate, haz clic en los bordes de la mesa (arriba, abajo, izquierda, derecha) y luego en cada agujero. 1) Abre el laberinto de Barnes; su casilla Barnes se marca automáticamente. 2) Haz clic en Calibrate y en los bordes de la mesa en el orden arriba, abajo, izquierda, derecha. 3) Haz clic en cada agujero como si fuera una plataforma, o introdúcelos como posiciones polares. 4) Haz clic en Save and Return: los agujeros deberían mostrar discos blancos.
Más detalle
El laberinto de Barnes tiene su propia calibración, distinta de la del laberinto acuático: abre el laberinto de Barnes, haz clic en Calibrate, haz clic en los bordes de la mesa y luego en cada agujero. Haz clic en los bordes de la mesa en el orden N, S, O, E (arriba, abajo, izquierda, derecha) y luego en cada agujero como harías con una plataforma; con la calibración de alineación, introduce los agujeros como coordenadas polares (ángulo = 360 / número de agujeros, p. ej. 30° para 12; distancia al centro como proporción del radio). Introduce los diámetros correctos del laberinto y de los agujeros. Tras Save and Return, los agujeros quedan enmascarados con discos blancos (rosas si está activado el fin automático). Si los agujeros no quedan enmascarados, comprueba que la casilla Barnes esté marcada, lo que indica que abriste el laberinto de Barnes; si no, cierra la pantalla y abre el laberinto de Barnes.
Para profundizar
Si solo se sigue la mitad superior de la mesa, hay bordes oscuros visibles dentro del área calibrada: coloca la cámara justo encima para que la mesa se vea redonda en pantalla y comprueba haciendo clic justo dentro del borde. Un agujero desplazado se debe a haber hecho clic en O antes que en S. Un ratón defectuoso o con poca batería puede hacer doble clic. Guarda una copia de seguridad de un archivo de calibración que funcione.
¿Por qué el ensayo de Barnes no termina automáticamente cuando el animal llega al agujero de escape?
El ensayo solo termina por sí solo si 'Auto-end on escape hole' está activado. 1) En la pantalla Run del laberinto de Barnes, pon 'Auto-end on escape hole' en 'Yes' o 'Delay in Secs'. 2) O elige 'No' y haz clic en 'END' (o en el mando) cuando el animal entre por completo en el agujero. 3) Observa al animal: puede asomarse a un agujero sin entrar.
Más detalle
Un ensayo de Barnes termina por sí solo solo si 'Auto-end on escape hole' está activado en la pantalla Run del laberinto de Barnes; elige 'Yes', 'No' o 'Delay in Secs'. El laberinto de Barnes detecta cuándo el animal entra en el agujero objetivo. Muchos usuarios lo dejan en 'No' y hacen clic en 'END' ellos mismos, porque un animal puede investigar un agujero sin entrar y el sistema de seguimiento ignora los objetos oscuros detrás de las máscaras blancas de los agujeros, así que terminar a mano evita terminar demasiado pronto. Cualquier estímulo aversivo USB o eléctrico puede detenerse cuando el sujeto se acerca al agujero objetivo.
Para profundizar
Una línea .txp de Barnes es salida, agujero objetivo, sujeto, descriptor, p. ej. C,1,mouse1,groupA. Para salir desde el centro escribe 'Center' (o C) en el campo de salida; aparece en los resultados.
La trayectoria de Barnes salta al principio o muestra líneas rectas. ¿Cómo lo soluciono?
Normalmente una sombra pasajera (tu mano o el recipiente de salida) atrae al sistema de seguimiento; trabaja desde la parte inferior de la pantalla y evita las sombras. 1) Usa un vaso de precipitados pequeño como recipiente de salida. 2) Lleva guante y manga blancos. 3) Colócate en el extremo 'sur' (parte inferior de la pantalla). 4) O haz clic en inicio justo después de que tu mano haya salido del área.
Más detalle
El sistema de seguimiento explora desde la parte superior de la imagen y se fija en el primer objeto que cumple los criterios de tamaño y oscuridad, así que las sombras del recipiente de salida o del experimentador provocan saltos. Soluciones: un vaso de precipitados más pequeño, guante y manga blancos, trabajar desde el extremo sur o empezar solo cuando la mano o la sombra se hayan ido (puede perderse alrededor de 0,5 s). Las trayectorias no se suavizan artificialmente, así que las trayectorias dentadas reflejan movimientos bruscos. Las caídas breves del seguimiento (líneas rectas) se deben a luz desigual o a tareas en segundo plano: haz la iluminación uniforme y difusa con focos hacia arriba alrededor del laberinto a la altura de la mesa o por debajo, elimina los puntos negros (sombras) en la comprobación de iluminación, evita los puntos rojos (reflejos) y cierra otros programas.
Para profundizar
Cámara: abre el diafragma por completo para que la mesa se vea casi blanca como las máscaras, haz zoom hasta que el laberinto casi llene la ventana y luego enfoca. Ajusta el control de tamaño para que el pequeño recuadro verde sea más ancho que la cola pero quepa dentro del cuerpo. HVS puede revisar montajes a partir de archivos .hvs sin procesar. Para mostrar la pantalla durante la práctica, abre la Herramienta Recortes antes que HVS y usa la captura de vídeo (durante los ensayos reales solo debe ejecutarse HVS) o usa un vídeo del teléfono móvil.
¿Cómo analizo ensayos de Barnes (errores, visitas a agujeros, trayectoria primaria)?
Un análisis de Barnes mide con qué rapidez y precisión encuentra el animal el agujero de escape: errores (exploraciones en agujeros incorrectos), visitas a agujeros, latencia y trayectoria primaria. Usa 'Barnes Maze' > 'ANALYZE', con contadores alrededor de los agujeros y la franja de tigmotaxis. 1) En Advanced, ajusta la franja de tigmotaxis para que los agujeros queden dentro (p. ej. 0,65) y el tamaño de los contadores para la investigación de agujeros (p. ej. 2,0). 2) Doble clic en un ensayo para el trazado, 'OK' para el resumen. 3) Para muchos ensayos crea un SUM y luego un CST; ignora las medidas exclusivas del laberinto acuático.
Más detalle
La trayectoria primaria es el recorrido desde la salida hasta la primera aproximación al agujero de escape, y los errores primarios son los agujeros incorrectos investigados antes de esa primera aproximación; junto con la latencia muestran con qué precisión encontró el animal la meta. HVS Image cuenta automáticamente las aproximaciones a los agujeros, registra las exploraciones (errores) por agujero y da la latencia y la trayectoria hasta el agujero objetivo y la longitud de la trayectoria primaria. Ajusta la franja de tigmotaxis (aquí el anillo que contiene los agujeros) y el tamaño de los contadores en Advanced. Los resultados de Barnes usan la terminología de Barnes (agujeros, no plataformas). Para un día de prueba de sondeo, marca Probe en Monitor en la pantalla Run del laberinto de Barnes.
Para profundizar
Para superponer trayectorias, resalta un archivo y haz clic en Multi Paths, añade ensayos a Selected Plots y haz clic en Plot y Export Image.
¿Qué cámara e iluminación necesito para un laberinto de Barnes?
Depende del diámetro y la altura del laberinto y de la altura del techo, así que envía esas medidas a HVS. Para la iluminación: 1) Ilumina de forma uniforme con focos hacia arriba alrededor del laberinto. 2) Elimina las sombras (puntos negros) y los reflejos (puntos rojos) en Check Lighting. 3) Busca que la mesa se vea casi blanca en pantalla.
Más detalle
El tipo de cámara depende del diámetro del laberinto, de su altura y de la distancia del techo a la superficie del laberinto. Los puntos rojos en Check Lighting son reflejos: cambia el ángulo de la luz, aleja las lámparas o usa bombillas más pequeñas; los animales oscuros sobre una mesa blanca pueden seguirse bien de todos modos, así que prueba. Usa cuatro focos bajos orientados hacia arriba repartidos alrededor del laberinto a unos 2 m, por debajo de la superficie de la mesa si derraman luz hacia abajo, para que la mesa se vea casi blanca.
Para profundizar
La pantalla Run muestra toda la imagen de la cámara, así que una cámara de alta resolución da una vista más nítida de la mesa. El sistema de seguimiento de Barnes ignora los agujeros y los excrementos con sombras.
¿Cómo uso el botón Auditory para tonos en un laberinto seco?
El botón Auditory reproduce sonidos en un laberinto acuático seco con 'Auto-end on platform'. 1) Haz clic izquierdo hasta que muestre 'Auditory Off' para desactivar el sonido. 2) Haz clic derecho para elegir el sonido que suena durante el ensayo ('Tone on Swim') y al llegar a la plataforma ('Tone on End'). 3) El tono se detiene por sí solo al final de cada ensayo y al cerrar la pantalla Run.
Más detalle
El botón Auditory es para el laberinto acuático seco con 'Auto-end on platform'. El clic izquierdo va cambiando hasta 'Auditory Off'. El clic derecho permite elegir el archivo que suena durante el ensayo ('Tone on Swim') y al llegar a la plataforma ('Tone on End'). El tono se detiene por sí solo al final de cada ensayo y al cerrarse la pantalla Run.
Para profundizar
Para ver una trayectoria más despacio: usa intervalos de tiempo (p. ej. 0-10 s, 10-20 s), que guardan trazados y análisis por intervalo, o marca 'Real time plot' para trazar puntos y luego una línea.
¿Cómo debo montar un laberinto de Barnes?
Usa una mesa redonda elevada con agujeros alrededor del borde y una caja de escape. Ilumínala intensamente y mantén las claves fijas en las paredes. Gira y limpia la mesa entre animales. Tu comité de ética local, las condiciones de tu licencia y el veterinario siempre tienen prioridad.
Más detalle
Un laberinto de Barnes es una mesa circular elevada con agujeros alrededor del borde, uno de los cuales lleva a una caja de escape; dimensiónala para tu especie y límpiala entre animales. Ratas: mesas de 100-122 cm, 18-20 agujeros, 80-90 cm de altura; ratones: 65-92 cm [Gawel 2019]; el original, 122 cm y 18 agujeros [Barnes 1979]. Gira y limpia para eliminar el olor [Gawel 2019].
Para profundizar
Las mesas más grandes favorecen las estrategias espaciales; las paredes favorecen la búsqueda en serie [Gawel 2019].
¿Cómo debo ajustar el tamaño del sujeto en un laberinto de Barnes u otro laberinto seco?
Ajusta Subject Size para que el recuadro de seguimiento sea mayor que cualquier excremento pero menor que el animal. 1) Empieza sin heces en el laberinto. 2) Mueve el control a la derecha hasta que aparezca la cruz. 3) Sigue hasta que la retícula sea mayor que cualquier excremento y algo menor que el animal.
Más detalle
Sin heces presentes, mueve el control Subject Size a la derecha hasta que aparezca la cruz verde de seguimiento y luego hasta que la retícula encierre un área mayor en todas las direcciones que cualquier excremento esperado y algo menor que el animal. Si no aparece ninguna cruz con el umbral en 100, mueve el control un paso desde la izquierda y sube el umbral hasta que aparezca. Cuando aparezcan heces, comprueba que se ignoran de forma constante y aumenta el tamaño del sujeto si hace falta.
Para profundizar
Centra la cruz ajustando el umbral: más bajo para animales oscuros sobre fondo claro, más alto para animales blancos sobre fondo oscuro.
Para el seguimiento y el análisis de la prueba, consulta HVS Image para el laberinto de Barnes.
Fuentes
- Barnes (1979). Memory deficits associated with senescence: A neurophysiological and behavioral study in the rat. Journal of Comparative and Physiological Psychology 93(1):74-104. doi:10.1037/h0077579
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